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黃曲霉毒素的分類、危害及檢測

一、分類及危害

黃曲霉毒素(AFT)是黃曲霉寄生曲霉等某些菌株產(chǎn)生的雙呋喃環(huán)類毒素。其衍生物有約20種,分別命名為B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等。其中以B1的毒性最大,致癌性最強(qiáng)。動(dòng)物食用黃曲霉毒素污染的飼料后,在肝、腎、肌肉、血、奶及蛋中可測出極微量的毒素。黃曲霉毒素及其產(chǎn)生菌在自然界中分布廣泛,有些菌株產(chǎn)生不止一種類型的黃曲霉毒素,在黃曲霉中也有不產(chǎn)生任何類型黃曲霉毒素的菌株。黃曲霉毒素主要污染糧油及其制品,各種植物性與動(dòng)物性食品也能被污染。

黃曲霉毒素是黃曲霉、寄生曲霉等產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物.當(dāng)糧食未能及時(shí)曬干及儲(chǔ)藏不當(dāng)時(shí) ,往往容易被黃曲霉或寄生曲霉污染而產(chǎn)生此類毒素.霉變的花生、玉米,大米、小麥、豆類、堅(jiān)果類、肉類、乳及乳制品、水產(chǎn)品等均有黃曲霉素.其中以花生和玉米污染最嚴(yán)重.

二、檢測方法

薄層色譜法(TLC)

TLC法是測定黃曲霉毒素的經(jīng)典方法,是中國測定食品及飼料中AFT黃曲霉素B1(AFB1)的標(biāo)準(zhǔn)方法之一(GB/T5009.23-2006)。其原理是針對(duì)不同的樣品,用適宜的提取溶劑將AFB1從樣品中提取出來,經(jīng)溶劑萃取純化,再在薄層板上層析展開,分離,利用AFB1的熒光特性,根據(jù)熒光斑點(diǎn)的大小和強(qiáng)弱,比較測定黃曲霉毒素含量。

TLC有單項(xiàng)展開法和雙向展開法,TLC法由于設(shè)備簡單,易于普及,所以國內(nèi)外仍在使用,但由于該法樣品前處理繁瑣,且提取和凈化效果不夠理想,提取液中雜質(zhì)較多因而在展開時(shí)影響斑點(diǎn)的熒光強(qiáng)度,而雙向展開雖避免了雜質(zhì)干擾,增加了靈敏度,但增加了操作步驟和時(shí)間。

液相色譜法

高效液相色譜法對(duì)黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2分別進(jìn)行定量分析。其主要是用熒光檢測器檢測,在適宜的流動(dòng)相條件下,采用反相C18柱,使多種黃曲霉毒素同時(shí)分離。黃曲霉毒素免疫親和柱HPLC法采用單克隆抗體免疫技術(shù),可以特效地將黃曲霉毒素與其他真菌素分離出來,分離效率和回收率高。此方法已得到廣泛應(yīng)用,并被美國官方分析化學(xué)家協(xié)會(huì)(AOAC)確認(rèn)為官方檢測方法。該方法的檢測限可達(dá)0.02~5ppb。

酶聯(lián)免疫法(ELISA)

酶聯(lián)免疫法檢測AFB1的理論基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),其采用單克隆或多克隆抗體技術(shù),具有特異性強(qiáng)、分析時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。其原理是抗原(或抗體)吸附于載體上的免疫吸附劑和用酶標(biāo)抗體(或抗原)與標(biāo)本中的待測物(抗原或抗體)起特異的免疫學(xué)反應(yīng),最后用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度。大體分為2類:一是用雙抗體夾心法檢測樣本中的AFTB1, 二是用競爭法檢測樣本中的AFTB1,。為了使用方便,國內(nèi)外已研制了酶標(biāo)記免疫吸附測定試劑盒及配套儀器,方法也被列入國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T5009.22 1996第二法)。  

但由于ELISA法中酶的活性易受反應(yīng)條件影響,因此ELISA法測定結(jié)果穩(wěn)定性較差,分析結(jié)果的準(zhǔn)確性不高,容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

一般來說,組織中黃曲霉毒素含量很低,而液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法具有比高效色譜法更高的靈敏度和準(zhǔn)確性,如今這種方法還極少使用在測定組織霉菌毒素含量中。該方法檢測限可達(dá)0.02~0.025 ppb。84%甲醇水溶液提取樣品中,正己烷脫脂,HLB固相萃取柱凈化。采用電噴霧電離,正離子掃描,選擇多反應(yīng)檢測模式(MRM)監(jiān)測,外標(biāo)法定量,該法靈敏,結(jié)果可靠。

三、食品的防霉去毒措施

吉林大學(xué)軍需科技學(xué)院食品質(zhì)量安全專業(yè)教授徐克成介紹,顆粒狀的被污染糧食可通過晾曬、清洗消除部分黃曲霉,但如果是粉末狀的食物或飼料,則很難通過以上方法清除。

(1)防霉:控制糧食含水量在12~13%以下即可防霉。保持米粒及花生外殼的完整,使用化學(xué)熏蒸劑,對(duì)防止霉菌侵染也有一定作用。

(2)去毒方法:挑除霉粒:適用花生。因黃曲霉素主要存在于發(fā)霉,變色,破損及皺縮的花生中,挑除后,可使黃曲霉毒素含量顯著降低。碾軋加工及加水搓洗:適應(yīng)于大米,因毒素主要存在于米糠及大米表層。脫胚去毒:適用于玉米。脫胚法有兩種:一是浮選,將玉米碾3MM左右的碎粒。加入清水,攪拌,輕搓,胚部碎片輕而上浮,撈出浮層;二是碾軋法,將玉米碾軋,去掉外皮及胚部.

(3)加強(qiáng)食品衛(wèi)生監(jiān)測。 

(4)加堿破壞毒素:適用于食用油.

(5)其他:如紫外線照射,鹽炒法等有一定去毒效果。

我公司服務(wù)內(nèi)容:

檢測品類:食用油、油脂及其制品、玉米、大豆、谷物、牛乳及其制品等。

檢測項(xiàng)目:黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2、黃曲霉毒素M1。

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